EF 400mm f/2.8L IS II USM是一款焦距为400mm的L级F2.8大光圈超远摄定焦镜头。镜身的主要部件由镁合金和钛金属构成。重量约为3850克。光学结构采用了2片萤石镜片，能有效抑制远摄镜头特有的色像差，从而实现高画质。优化的镜片配置和镀膜能减少眩光和鬼影的发生。第12片镜片采用了能抑制反射光发生的SWC亚波长结构镀膜，有效提升逆光拍摄质量。为防止最前端和最后端镜片上附着污垢，还采用了憎油憎水性能优秀的防污氟镀膜。

手抖动补偿机构部分的镜筒采用了低摩擦构造，同时结合新算法，实现了最大相当于提高约4级快门速度的手抖动补偿效果。除了普通拍摄下手抖动补偿“模式1”，以及可应对追随拍摄的“模式2”之外，还搭载了仅在曝光时进行手抖动补偿的“模式3”。此外，还在对焦模式中增添电动对焦的PF模式，以便能够依靠电力以一定速度平滑地移动对焦位置，特别是在短片拍摄时能发挥其优势。